eng
Выпуск #6/2012
П.Горелов, А.Балацкий
Изучение полиморфизма генов развития инфаркта миокарда GJA4 и NOS3 на амплификаторах SpeedCycler2 и Swift MaxPro
Изучение полиморфизма генов развития инфаркта миокарда GJA4 и NOS3 на амплификаторах SpeedCycler2 и Swift MaxPro
Просмотры: 2522
Изучен полиморфизм генов GJA4 и NOS3 с использованием новых амплификаторов SpeedCycler2 (Analytik Jena, Германия) и Swift MaxPro (ESCO, Сингапур). Для сравнения применяли известный амплификатор Mastercycler (Eppendorf, Германия).
Теги: coronary artery disease gene diagnostics gene gja4 gene nos3 genetic predisposition myocardial infarction polymorphism ген gja4 ген nos3 генетическая предрасположенность генодиагностика инфаркт миокарда ишемическая болезнь сердца полиморфизм
К настоящему времени в геноме человека выявлены миллионы однонуклеотидных замен, часть из которых приводит к изменениям структуры или функциональной активности белков. Подобные генетические перестройки, затрагивающие взаимодействующие белки или звенья одной регуляторной системы, могут как уменьшать, так и взаимно усиливать действие друг друга. Выявление таких изменений может существенно помочь в генодиагностике. Кроме того, комбинации генетических тестов обладают большей предсказательной силой.
Рассмотрим комбинацию полиморфных аллелей генов PPP2R и NOS3 с точки зрения прогнозирования развития артериальной гипертензии (АГ) у человека. Исследования, в которых приняли участие более 500 пациентов, показали, что однонуклеотидные замены генов PPP2R и NOS3 сами по себе не оказывают заметного влияния на развитие АГ у мужчин, однако их сочетание значительно повышает риск развития этого заболевания [1, 9].
Известно, что комбинации полиморфизма генов GJA4 и NOS3 могут привести к развитию инфаркта миокарда (ИМ) [1, 2]. Так, американские ученые в 1997 году описали однонуклеотидную замену цитозина на тимин в 1019 положении гена GJA4, что привело к замене пролина на серин в кодоне 319 аминокислотной последовательности GJA4 [1]. Функциональное значение этого полиморфизма обсуждалось в дальнейших работах [2–4], так же была продемонстрирована связь генотипа ТТ гена GJA4 с развитием ИМ. По данным российских ученых за 2010 год, шансы развития ИМ у больных ишемической болезнью сердца (ИБС), имеющих генотип ТТ, возрастают в 2,87 раза (рис.1) [5].
Исследования показали также (рис.2), что у носителей генотипа ТТ в 94,92% случаев ИМ развивается без предшествующего коронарного анамнеза, в то время как у носителей других генотипов (СС и СТ) это происходит в 72,4% случаев.
Ген NOS3 локализован в хромосоме 7q35-36 и кодирует белок с молекулярной массой 135 кДа, состоящий из 1203 аминокислот [7, 8]. Замена гуанина тимином в 894-й позиции гена NOS3 приводит к замене глутамина аспарагином в 298-й позиции самого фермента (Glu298Asp) [5, 9]. Установлены многие антиатерогенные эффекты NOS3. Помимо влияния на сосудистый тонус, NOS3 ингибирует адгезию лейкоцитов, активацию, адгезию и агрегацию тромбоцитов и т.д. Поскольку он играет важную роль в развитии сердечно-сосудистой патологии, представляется важным совместное изучение полиморфизма генов NOS3 и GJA4. Известны сведения об экспериментах in vitro, показывающих взаимодействие генов GJA4 и NOS3, комбинации которых участвуют в развитии ИМ [6]. С целью выявления генетической предрасположенности к развитию ИМ проведено исследование по изучению полиморфизма генов GJA4 и NOS3 с использованием амплификаторов SpeedCycler2 и Swift MaxPro.
Определение полиморфизма G894T гена NOS3 проводили методом ПЦР-ПДРФ (полиморфизма длины рестрикционных фрагментов) на новых амплификаторах SpeedCycler2 (Analytik Jena, Германия) и Swift MaxPro (ESCO, Сингапур). В качестве сравнения использовали хорошо известный на рынке амплификатор Mastercycler (Eppendorf, Германия).
Выделение ДНК осуществляли с использованием центрифужных фильтров (колонок) с помощью набора innuPREP DNA Micro Kit (Analytik Jena, Германия). После денатурации (95⁰С, 3 мин) проводили ПЦР из 35 циклов, каждый из которых включал денатурацию (95⁰С, 10 с), отжиг праймеров (61,3⁰С, 10 с), элонгацию (72⁰С, 20 с). ПЦР проводили в смеси объемом 25 мкл с использованием 12,5 мкл готовой смеси DreamTaq Green PCR Master Mix (Fermentas, Латвия) и праймеров 5’-GGC TGG ACC CCA GGA AAC-3’ и 5’-CCA CCC AGT CAA TCC CTT TG-3’.
После проведения ПЦР полученные продукты амплификации в количестве 8,5 мкл ПЦР-продукта длиной 198 п.н.(пар нуклеотидов) инкубировали в термошейкерах, используя BioShake iQ (Analytik Jena, Германия) и Provocell PVC-1 (ESCO, Сингапур) при 370С с 0,5 мкл (10 Ед.) рестриктазы MboI и 1 мкл 10-кратного буфера для рестрикции. Продукты рестрикции визуализировали методом электрофореза в 2%-ном агарозном геле, содержащем 0,5 мкг/мл бромистого этидия. Анализ электрофоретического геля осуществляли с помощью гель-документирующей системы BDA live (Analytik Jena, Германия).
Определение полиморфизма С1019Т гена GJA4 проводили методом ПЦР-ПДРФ на амплификаторах SpeedCycler2 (Analytik Jena, Германия) и Swift MaxPro (ESCO, Сингапур), в качестве сравнения использовали Mastercycler (Eppendorf, Германия).
Выделение ДНК осуществляли с использованием центрифужных фильтров (колонок) с помощью набора innuPREP DNA Micro Kit (Analytik Jena, Германия). После денатурации (94⁰С, 3 мин) проводили ПЦР из 30 циклов, каждый из которых включал денатурацию (95⁰С, 10 с), отжиг праймеров (60⁰С, 10 с), элонгацию (72⁰С, 20 с). ПЦР проводили в смеси объемом 25 мкл с использованием 12,5 мкл готовой смеси DreamTaq Green PCR Master Mix (Fermentas, Латвия) и праймеров 5’-CTG GAC CCA CCC CCT CAG AAT GGC CAA AGA-3’ и 5’-AGG AAG CCG TAG TGC CTG GTG G-3’.
После проведения ПЦР, полученные продукты амплификации в количестве 8,5 мкл ПЦР-продукта длиной 275 п.н. инкубировали в термошейкерах BioShake iQ (AnalytikJena, Германия) и Provocell PVC-1 (ESCO, Сингапур) при 37⁰С с 0,5 мкл (5 Ед.) рестриктазы DrdI и 1 мкл 10-кратного буфера для рестрикции. Продукты рестрикции визуализировали методом электрофореза в 2%-ном агарозном геле, содержащем 0,5 мкг/мл бромистого этидия. Анализ электрофоретического геля осуществляли с помощью гель-документирующей системы BDA live (Analytik Jena, Германия).
ПЦР-анализ исследуемых генов GJA4 и NOS3 проведен на трех различных амплификаторах. Амплификатор SpeedCycler2 характеризуется как скоростной с открытой системой. Амплификатор Swift MaxPro характеризуется как отличный прибор для проведения рутинных исследований в лаборатории. Амплификатор Mastercycler мы использовали в качестве сравнения, поскольку он самый известный и в лабораториях его используют чаще других. Для достоверности исследования использованы идентичные реагенты и пластик для постановки ПЦР во всех трех амплификаторах.
На всех трех амплификаторах получены специфичные и четкие ПЦР-продукты гена NOS3 (рис.3). Денситометрический анализ электрофоретических полос проводили с помощью программы SCNImage.
На рис.4 представлены ПЦР-продукты амплификации гена GJA4. Наиболее четкие и высокоспецифичные фрагменты были получены на амплификаторе SpeedCycler2 благодаря особой конструкции термоблока с использованием наноматериалов нового поколения. На этом амплификаторе ПЦР прошла в два раза быстрее, что положительно сказалось на эффективности реакции. Поэтому амплификатор SpeedCycler2 мы рекомендуем использовать в лаборатории для исследований с большим потоком, где надо быстро получать надежные результаты. В свою очередь на амплификаторе Swift MaxPro получены результаты электрофореза лучше, чем на Mastercycler (рис.4). Кроме того, Swift MaxPro имеет интуитивно понятный интерфейс и обладает большим ЖК-экраном для удобной и комфортной работы. Этот амплификатор отлично подойдет для рутинных исследований в лаборатории.
Для определения генотипов в полученные продукты амплификации добавлили соответствующие рестриктазы. Затем ПЦР-продукты с рестриктазой инкубировали в термошейкерах.
Полученные продукты рестрикции гена NOS3 визуализировали методом электрофореза в 2%-ном агарозном геле (рис.5). Присутствие аллеля G выявляли по наличию одного фрагмента: 152 п.н., аллеля T – по наличию двух фрагментов: 92 и 60 п.н. (см. рис. 5).
Полученные продукты рестрикции гена GJA4 также визуализировали методом электрофореза в 2%-ном агарозном геле. В случае присутствия аллели С образовывались фрагменты 240 и 35 п.н. При наличии аллели Т сайт рестрикции отсутствует, фрагмент 275 п.н. на рис.6.
Исследования проводили у пациентов, перенесших ИМ. Общее число больных составило 81, из них 30 человек имели комбинацию генотипа ТТ у гена NOS3 и TT у гена GJA4, а 51 человек имели генотипы СС и СТ у генов NOS3 и GJA4. Оказалось, что у лиц, перенесших ИМ и имеющих сочетание генотипов TT у гена NOS3 и TT у гена GJA4, заболевание в 100% случаев развивалось без предшествующего коронарного анамнеза, в то время, как у пациентов с другими генотипами это происходило в 66,7% случаев (рис.7). Таким образом показана значимость комбинации полиморфизмов генов GJA4 и NOS3 для выявления генетической предрасположенности к развитию ИМ у человека. Показано, что новые амплификаторы SpeedCycler2 и Swift MaxPro справились со всеми поставленными задачами, более того, по основным характеристикам превзошли амплификатор Mastercycler.
Также показано, что амплификаторы SpeedCycler2 и Swift MaxPro имеют полностью открытую систему для реагентов и пластика любых производителей и могут быть рекомендованы к использованию для молекулярно-генетических исследований, в частности, для генетической диагностики. Кроме того, использованные в работе компактные и бесшумные термошейкеры BioShake iQ и Provocell PVC-1 характеризуются быстрым нагревом и гомогенным поддержанием температуры в течение длительного времени, поэтому мы рекомендуем их для проведения генетической диагностики в комплекте с амплификаторами SpeedCycler2 и Swift MaxPro.
ЛИТЕРАТУРА
1. Richard G., Lin JP., Smith L., Whyte YM., Itin P., Wollina U., Epstein E. Jr., Hohl D., Giroux J., Charnas L., Bale SJ., DiGiovanna J. Linkage studies in erythrokeratodermias: fine mapping, genetic heterogeneity and analysis of candidate genes. – Journal of Investigative Dermatology, 1997, v.109, p.666–671.
2. Hirashiki A., Yamada Y., Murase Y., Suzuki Y., Kataoka H., Morimoto Y., Tajika T., Murohara T., Yokota M. Association of gene polymorphisms with coronary artery disease in low- or high-risk subjects defined by conventional risk factors. – Journal of the American College of Cardiology, 2003, v.42, p.1429–1437.
3. Listì F., Candore G., Lio D., Russo M., Colonna-Romano G., Caruso M., Hoffmann E., Caruso C. Association between C1019T polymorphism of connexin37 and acute myocardial infarction: a study in patients from Sicily. – International Journal of Cardiology, v.102, p.269–271.
4. Listì F., Candore G., Balistreri CR., Caruso M., Incalcaterra E., Hoffmann E., Lio D., Caruso C. Connexin37 1019 gene polymorphism in myocardial infarction patients and centenarians. – Atherosclerosis, 200, v.191, p.460–461.
5. Самоходская Л.М., Андреенко Е.Ю., Балацкий А.В., Ершова А.И., Макаревич П.И. Определение индивидуального генетического риска развития сердечно-сосудистых заболеваний. Методическое пособие по молекулярной генетике (науч. ред. акад. РАН и РАМН В.А.Ткачук). – М.: Издательство МГУ, 2010.
6. Pfenniger A., Derouette J., Verma V., Lin X., Foglia B., Coombs W., Roth I., Satta N., Dunoyer-Geindre S., Sorgen P., Taffet S., Kwak B., Delmar M. Gap junction protein Cx37 interacts with endothelial nitric oxide synthase in endothelial cells. – Arteriosclerosis, Thrombosis, Vascular Biology, 2010, v.30, p.827–834.
7. Балацкий А., Андреенко Е., Самоходская Л. Полиморфизм гена коннексина-37: новый фактор риска развития инфаркта миокарда. Материалы международной конференции "Современная кардиология: эра инноваций", Томск, 24–25 июня 2010 г. – Сибирский медицинский журнал, 2010, т.25, с.64–65.
8. Uematsu M., Ohara Y., Navas J., Nishida K., Murphy T., Alexander R., Nerem R., Harrison D. Regulation of endothelial cell nitric oxide synthase mRNA expression by shear stress.– American Journal of Physiology, 1995, v.269, p.1371–1378.
9. Макаревич П., Андреенко Е., Балацкий А. и др. Комбинации аллелей генов NOS3 и CYBA и риск развития эссенциальной артериальной гипертонии у мужчин. – Кардиоваскулярная терапия и профилактика, 2010, т.9, №3, с.4–9.
Рассмотрим комбинацию полиморфных аллелей генов PPP2R и NOS3 с точки зрения прогнозирования развития артериальной гипертензии (АГ) у человека. Исследования, в которых приняли участие более 500 пациентов, показали, что однонуклеотидные замены генов PPP2R и NOS3 сами по себе не оказывают заметного влияния на развитие АГ у мужчин, однако их сочетание значительно повышает риск развития этого заболевания [1, 9].
Известно, что комбинации полиморфизма генов GJA4 и NOS3 могут привести к развитию инфаркта миокарда (ИМ) [1, 2]. Так, американские ученые в 1997 году описали однонуклеотидную замену цитозина на тимин в 1019 положении гена GJA4, что привело к замене пролина на серин в кодоне 319 аминокислотной последовательности GJA4 [1]. Функциональное значение этого полиморфизма обсуждалось в дальнейших работах [2–4], так же была продемонстрирована связь генотипа ТТ гена GJA4 с развитием ИМ. По данным российских ученых за 2010 год, шансы развития ИМ у больных ишемической болезнью сердца (ИБС), имеющих генотип ТТ, возрастают в 2,87 раза (рис.1) [5].
Исследования показали также (рис.2), что у носителей генотипа ТТ в 94,92% случаев ИМ развивается без предшествующего коронарного анамнеза, в то время как у носителей других генотипов (СС и СТ) это происходит в 72,4% случаев.
Ген NOS3 локализован в хромосоме 7q35-36 и кодирует белок с молекулярной массой 135 кДа, состоящий из 1203 аминокислот [7, 8]. Замена гуанина тимином в 894-й позиции гена NOS3 приводит к замене глутамина аспарагином в 298-й позиции самого фермента (Glu298Asp) [5, 9]. Установлены многие антиатерогенные эффекты NOS3. Помимо влияния на сосудистый тонус, NOS3 ингибирует адгезию лейкоцитов, активацию, адгезию и агрегацию тромбоцитов и т.д. Поскольку он играет важную роль в развитии сердечно-сосудистой патологии, представляется важным совместное изучение полиморфизма генов NOS3 и GJA4. Известны сведения об экспериментах in vitro, показывающих взаимодействие генов GJA4 и NOS3, комбинации которых участвуют в развитии ИМ [6]. С целью выявления генетической предрасположенности к развитию ИМ проведено исследование по изучению полиморфизма генов GJA4 и NOS3 с использованием амплификаторов SpeedCycler2 и Swift MaxPro.
Определение полиморфизма G894T гена NOS3 проводили методом ПЦР-ПДРФ (полиморфизма длины рестрикционных фрагментов) на новых амплификаторах SpeedCycler2 (Analytik Jena, Германия) и Swift MaxPro (ESCO, Сингапур). В качестве сравнения использовали хорошо известный на рынке амплификатор Mastercycler (Eppendorf, Германия).
Выделение ДНК осуществляли с использованием центрифужных фильтров (колонок) с помощью набора innuPREP DNA Micro Kit (Analytik Jena, Германия). После денатурации (95⁰С, 3 мин) проводили ПЦР из 35 циклов, каждый из которых включал денатурацию (95⁰С, 10 с), отжиг праймеров (61,3⁰С, 10 с), элонгацию (72⁰С, 20 с). ПЦР проводили в смеси объемом 25 мкл с использованием 12,5 мкл готовой смеси DreamTaq Green PCR Master Mix (Fermentas, Латвия) и праймеров 5’-GGC TGG ACC CCA GGA AAC-3’ и 5’-CCA CCC AGT CAA TCC CTT TG-3’.
После проведения ПЦР полученные продукты амплификации в количестве 8,5 мкл ПЦР-продукта длиной 198 п.н.(пар нуклеотидов) инкубировали в термошейкерах, используя BioShake iQ (Analytik Jena, Германия) и Provocell PVC-1 (ESCO, Сингапур) при 370С с 0,5 мкл (10 Ед.) рестриктазы MboI и 1 мкл 10-кратного буфера для рестрикции. Продукты рестрикции визуализировали методом электрофореза в 2%-ном агарозном геле, содержащем 0,5 мкг/мл бромистого этидия. Анализ электрофоретического геля осуществляли с помощью гель-документирующей системы BDA live (Analytik Jena, Германия).
Определение полиморфизма С1019Т гена GJA4 проводили методом ПЦР-ПДРФ на амплификаторах SpeedCycler2 (Analytik Jena, Германия) и Swift MaxPro (ESCO, Сингапур), в качестве сравнения использовали Mastercycler (Eppendorf, Германия).
Выделение ДНК осуществляли с использованием центрифужных фильтров (колонок) с помощью набора innuPREP DNA Micro Kit (Analytik Jena, Германия). После денатурации (94⁰С, 3 мин) проводили ПЦР из 30 циклов, каждый из которых включал денатурацию (95⁰С, 10 с), отжиг праймеров (60⁰С, 10 с), элонгацию (72⁰С, 20 с). ПЦР проводили в смеси объемом 25 мкл с использованием 12,5 мкл готовой смеси DreamTaq Green PCR Master Mix (Fermentas, Латвия) и праймеров 5’-CTG GAC CCA CCC CCT CAG AAT GGC CAA AGA-3’ и 5’-AGG AAG CCG TAG TGC CTG GTG G-3’.
После проведения ПЦР, полученные продукты амплификации в количестве 8,5 мкл ПЦР-продукта длиной 275 п.н. инкубировали в термошейкерах BioShake iQ (AnalytikJena, Германия) и Provocell PVC-1 (ESCO, Сингапур) при 37⁰С с 0,5 мкл (5 Ед.) рестриктазы DrdI и 1 мкл 10-кратного буфера для рестрикции. Продукты рестрикции визуализировали методом электрофореза в 2%-ном агарозном геле, содержащем 0,5 мкг/мл бромистого этидия. Анализ электрофоретического геля осуществляли с помощью гель-документирующей системы BDA live (Analytik Jena, Германия).
ПЦР-анализ исследуемых генов GJA4 и NOS3 проведен на трех различных амплификаторах. Амплификатор SpeedCycler2 характеризуется как скоростной с открытой системой. Амплификатор Swift MaxPro характеризуется как отличный прибор для проведения рутинных исследований в лаборатории. Амплификатор Mastercycler мы использовали в качестве сравнения, поскольку он самый известный и в лабораториях его используют чаще других. Для достоверности исследования использованы идентичные реагенты и пластик для постановки ПЦР во всех трех амплификаторах.
На всех трех амплификаторах получены специфичные и четкие ПЦР-продукты гена NOS3 (рис.3). Денситометрический анализ электрофоретических полос проводили с помощью программы SCNImage.
На рис.4 представлены ПЦР-продукты амплификации гена GJA4. Наиболее четкие и высокоспецифичные фрагменты были получены на амплификаторе SpeedCycler2 благодаря особой конструкции термоблока с использованием наноматериалов нового поколения. На этом амплификаторе ПЦР прошла в два раза быстрее, что положительно сказалось на эффективности реакции. Поэтому амплификатор SpeedCycler2 мы рекомендуем использовать в лаборатории для исследований с большим потоком, где надо быстро получать надежные результаты. В свою очередь на амплификаторе Swift MaxPro получены результаты электрофореза лучше, чем на Mastercycler (рис.4). Кроме того, Swift MaxPro имеет интуитивно понятный интерфейс и обладает большим ЖК-экраном для удобной и комфортной работы. Этот амплификатор отлично подойдет для рутинных исследований в лаборатории.
Для определения генотипов в полученные продукты амплификации добавлили соответствующие рестриктазы. Затем ПЦР-продукты с рестриктазой инкубировали в термошейкерах.
Полученные продукты рестрикции гена NOS3 визуализировали методом электрофореза в 2%-ном агарозном геле (рис.5). Присутствие аллеля G выявляли по наличию одного фрагмента: 152 п.н., аллеля T – по наличию двух фрагментов: 92 и 60 п.н. (см. рис. 5).
Полученные продукты рестрикции гена GJA4 также визуализировали методом электрофореза в 2%-ном агарозном геле. В случае присутствия аллели С образовывались фрагменты 240 и 35 п.н. При наличии аллели Т сайт рестрикции отсутствует, фрагмент 275 п.н. на рис.6.
Исследования проводили у пациентов, перенесших ИМ. Общее число больных составило 81, из них 30 человек имели комбинацию генотипа ТТ у гена NOS3 и TT у гена GJA4, а 51 человек имели генотипы СС и СТ у генов NOS3 и GJA4. Оказалось, что у лиц, перенесших ИМ и имеющих сочетание генотипов TT у гена NOS3 и TT у гена GJA4, заболевание в 100% случаев развивалось без предшествующего коронарного анамнеза, в то время, как у пациентов с другими генотипами это происходило в 66,7% случаев (рис.7). Таким образом показана значимость комбинации полиморфизмов генов GJA4 и NOS3 для выявления генетической предрасположенности к развитию ИМ у человека. Показано, что новые амплификаторы SpeedCycler2 и Swift MaxPro справились со всеми поставленными задачами, более того, по основным характеристикам превзошли амплификатор Mastercycler.
Также показано, что амплификаторы SpeedCycler2 и Swift MaxPro имеют полностью открытую систему для реагентов и пластика любых производителей и могут быть рекомендованы к использованию для молекулярно-генетических исследований, в частности, для генетической диагностики. Кроме того, использованные в работе компактные и бесшумные термошейкеры BioShake iQ и Provocell PVC-1 характеризуются быстрым нагревом и гомогенным поддержанием температуры в течение длительного времени, поэтому мы рекомендуем их для проведения генетической диагностики в комплекте с амплификаторами SpeedCycler2 и Swift MaxPro.
ЛИТЕРАТУРА
1. Richard G., Lin JP., Smith L., Whyte YM., Itin P., Wollina U., Epstein E. Jr., Hohl D., Giroux J., Charnas L., Bale SJ., DiGiovanna J. Linkage studies in erythrokeratodermias: fine mapping, genetic heterogeneity and analysis of candidate genes. – Journal of Investigative Dermatology, 1997, v.109, p.666–671.
2. Hirashiki A., Yamada Y., Murase Y., Suzuki Y., Kataoka H., Morimoto Y., Tajika T., Murohara T., Yokota M. Association of gene polymorphisms with coronary artery disease in low- or high-risk subjects defined by conventional risk factors. – Journal of the American College of Cardiology, 2003, v.42, p.1429–1437.
3. Listì F., Candore G., Lio D., Russo M., Colonna-Romano G., Caruso M., Hoffmann E., Caruso C. Association between C1019T polymorphism of connexin37 and acute myocardial infarction: a study in patients from Sicily. – International Journal of Cardiology, v.102, p.269–271.
4. Listì F., Candore G., Balistreri CR., Caruso M., Incalcaterra E., Hoffmann E., Lio D., Caruso C. Connexin37 1019 gene polymorphism in myocardial infarction patients and centenarians. – Atherosclerosis, 200, v.191, p.460–461.
5. Самоходская Л.М., Андреенко Е.Ю., Балацкий А.В., Ершова А.И., Макаревич П.И. Определение индивидуального генетического риска развития сердечно-сосудистых заболеваний. Методическое пособие по молекулярной генетике (науч. ред. акад. РАН и РАМН В.А.Ткачук). – М.: Издательство МГУ, 2010.
6. Pfenniger A., Derouette J., Verma V., Lin X., Foglia B., Coombs W., Roth I., Satta N., Dunoyer-Geindre S., Sorgen P., Taffet S., Kwak B., Delmar M. Gap junction protein Cx37 interacts with endothelial nitric oxide synthase in endothelial cells. – Arteriosclerosis, Thrombosis, Vascular Biology, 2010, v.30, p.827–834.
7. Балацкий А., Андреенко Е., Самоходская Л. Полиморфизм гена коннексина-37: новый фактор риска развития инфаркта миокарда. Материалы международной конференции "Современная кардиология: эра инноваций", Томск, 24–25 июня 2010 г. – Сибирский медицинский журнал, 2010, т.25, с.64–65.
8. Uematsu M., Ohara Y., Navas J., Nishida K., Murphy T., Alexander R., Nerem R., Harrison D. Regulation of endothelial cell nitric oxide synthase mRNA expression by shear stress.– American Journal of Physiology, 1995, v.269, p.1371–1378.
9. Макаревич П., Андреенко Е., Балацкий А. и др. Комбинации аллелей генов NOS3 и CYBA и риск развития эссенциальной артериальной гипертонии у мужчин. – Кардиоваскулярная терапия и профилактика, 2010, т.9, №3, с.4–9.
Отзывы читателей
