eng
В работе описаны многоходовые кюветы, предназначенные для измерения флуоресценции слабо поглощающих растворов.
Зеркальная кювета устроена так, что возбуждающий свет отражается алюминиевым слоем, нанесенным на внешние стороны кварцевой ячейки, и покрытым снаружи защитным слоем (рис.1а). Возбуждающий свет, входящий через узкое окошко во фронтальной зеркальной стенке кюветы, проходит через раствор и попадает на зеркальную противоположную сторону, отклоняется и подвергается двум или трем отражениям внутри кюветы (рис.2а). Излучение собирается под прямым углом. Дополнительный светосбор излучения обеспечивается зеркальной боковой стенкой, направляющей флуоресценцию в канал регистрации. Зеркальная кювета создает 3–5-кратное усиление флуоресценции (рис.3). При ее использовании световые потери и паразитная поляризация минимальны по сравнению с обычной кюветой, расположенной около вогнутых зеркал. Зеркальная кювета может использоваться без каких-либо модификаций почти в любых спектрофлуориметрах [1].
Зеркальная микрокювета позволяет использовать малые количества растворов (0,2–0,5 мл) и обеспечивает 3–4-кратное усиление интенсивности флуоресценции (рис.1б). Эта кювета фиксируется в специальном держателе, адаптированном по габаритам под все коммерческие спектрофлуориметры.
В кювете полного внутреннего отражения (ПВО) возбуждающий свет входит через узкое окошко в боковой части фронтальной грани и отражается четыре–шесть раз на границе кварц/воздух с помощью двух наружных приклеенных призм, а боковая зеркальная грань направляет излучение в канал регистрации (рис.1в, 2б). Эта кювета обеспечивает 4–8-кратное усиление интенсивности, если используется параллельный (лазерный) возбуждающий пучок.
Кювета, снабженная диагональной кварцевой пластинкой, помещаемой внутрь обычной или зеркальной кюветы, дополнительно обеспечивает резкое повышение сигнала флуоресценции (рис.4). С использованием диагональной пластинки в кювете удобно проводить многократные измерения одного и того же образца. Удается определять чрезвычайно малые концентрации веществ, например, следовые количества белков и ДНК [2]. Такие кюветы можно использовать для медико-биологических анализов, в криминалистике и других областях.
ЛИТЕРАТУРА
1. Векшин Н. Флуоресцентная спектроскопия биополимеров. – Пущино: Фотон-век, 2008.
2. Векшин Н. Повышение чувствительности флуоресцентного анализа нанесением препарата на пластину, установленную по диагонали кюветы. – Приборы и техника эксперимента, 2008, №2, с.166–168.
Зеркальная микрокювета позволяет использовать малые количества растворов (0,2–0,5 мл) и обеспечивает 3–4-кратное усиление интенсивности флуоресценции (рис.1б). Эта кювета фиксируется в специальном держателе, адаптированном по габаритам под все коммерческие спектрофлуориметры.
В кювете полного внутреннего отражения (ПВО) возбуждающий свет входит через узкое окошко в боковой части фронтальной грани и отражается четыре–шесть раз на границе кварц/воздух с помощью двух наружных приклеенных призм, а боковая зеркальная грань направляет излучение в канал регистрации (рис.1в, 2б). Эта кювета обеспечивает 4–8-кратное усиление интенсивности, если используется параллельный (лазерный) возбуждающий пучок.
Кювета, снабженная диагональной кварцевой пластинкой, помещаемой внутрь обычной или зеркальной кюветы, дополнительно обеспечивает резкое повышение сигнала флуоресценции (рис.4). С использованием диагональной пластинки в кювете удобно проводить многократные измерения одного и того же образца. Удается определять чрезвычайно малые концентрации веществ, например, следовые количества белков и ДНК [2]. Такие кюветы можно использовать для медико-биологических анализов, в криминалистике и других областях.
ЛИТЕРАТУРА
1. Векшин Н. Флуоресцентная спектроскопия биополимеров. – Пущино: Фотон-век, 2008.
2. Векшин Н. Повышение чувствительности флуоресцентного анализа нанесением препарата на пластину, установленную по диагонали кюветы. – Приборы и техника эксперимента, 2008, №2, с.166–168.
Отзывы читателей
